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sábado, 2 de junho de 2012

ANÁLISES INSTRUMENTAL II - ELETROFORESE


Conhecida desde 1930, mas só foi difundida em 1950 - 1960
É um processo analítico de SEPARAÇÃO DE MISTURAS, cujo principal agente é o CAMPO ELÉTRICO.
Seu campo de aplicação tem sido amplamente aumentado, devido à SIMPLIFICAÇÃO DE APARELHAGEM utilizada e também à disponibilidade de meios de suporte altamente purificados, o que veio diminuir muito o tempo gasto na separação. Separa proteínas por cargas e peso molecular.
Refere-se a migração de partículas ou solutos carregados em um meio líquido sob a influência de um campo elétrico.

OBS.: NÃO HÁ REAÇÃO QUÍMICA, SOMENTE MIGRAÇÃO DE PARTÍCULAS.

PROPRIEDADES

- DNA - Carga negativa
- PROTEÍNAS - Carga positiva ou negativa (depende do pH da solução);

Eletroforese ocorre dentro de uma matriz ou gel, que por sua vez é submerso em um tampão.

MATERIAIS
- Cuba de eletroforese e uma fonte de energia/alimentadora;
- Bandejas de Gel (agarose) ou placas de vidro (poliacrilamida);
- Pentes (fazem sulcos aonde a amostra será ser aplicada);
- Espaçadores (poliacrilamida);
- Tampão de eletroforese (corrida);
- Tampão de amostra (glicerol e corante);
- Corantes PARA FACILITAR A APLICAÇÃO;
- Transiluminador;
- Densitômetro.












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